gus染色原理
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发布时间：2022-04-21 18:56
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热心网友
时间：2023-11-11 08:28
这是由其初始产物经氧化二聚作用形成的靛蓝染料，它使具Gus活性的部位或位点呈现蓝色，用肉眼或在显微镜下可看到，且在一定程度下根据染色深浅可反映出Gus活性。
因此利用该方法可观察到外源基因在特定器官、组织，甚至单个细胞内的表达情况。
根据gus基因检测所用的底物不同，可以选择三种检测方法：组织化学法、分光光度法和荧光法（灵感度为分光光度检测法最高）。其中最为常用的是组织化学法。
扩展资料
gus基因存在于E.coli等一些细菌基因组内，编码β-葡萄糖苷酸酶。β-葡萄糖苷酸酶是一个水解酶，以β-葡萄糖苷酸酯类物质为底物，其反应产物可用多种方法检测出来。
由于绝大多数植物没有检测到葡萄糖苷酸酶的背景活性，因此这个基因被广泛应用于基因*的研究中。其中组织化学法检测以5-溴-4-氯-3-吲哚-β-葡萄糖苷酸（X-Gluc）作为反应底物，将被检材料用含有底物的缓冲液浸泡。若组织细胞发生了gus基因的转化，并表达出Gus，在适宜的条件下，该酶就可将X-Gluc水解生成蓝色产物。
参考资料来源：百度百科——gus基因
热心网友
时间：2023-11-11 08:29
β- D - 葡糖醛酸酶（GUS基因编码）是从大肠杆菌K- 12 菌株分离出的一种酸性水解酶，能催化许多β-葡萄糖苷酯类物质的水解。其中很多水解产物具有发色团或形成荧光物质，采用某种β-葡萄糖苷酶作底物，其反应产物可用分光光度，荧光和组织化学的方法检测。其中组织化学法是催化的底物是X-gluc，产物为蓝色化合物，该方法可观察到外源基因在特定器官，组织，甚至单个细胞内的表达情况。
