EB溴化乙锭
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发布时间：2024-12-18 21:42
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溴化乙锭（EB）是一种高灵敏度的荧光染色剂，主要应用于琼脂糖和聚丙烯酰胺凝胶中的DNA观察。EB在标准302nm紫外光透射仪激发下发出橙红色信号，可使用Polaroid底片或带CCD成像头的凝胶成像处理系统进行拍摄。
观察琼脂糖凝胶中的DNA最常用的方法是通过使用荧光染料EB进行染色。EB具有一个可以嵌入DNA堆积碱基间的三环平面基团。它与DNA的结合几乎没有碱基序列特异性。在高离子强度的饱和溶液中，大约每2.5个碱基插入一个EB分子。染料分子插入后，平面基团与螺旋轴线垂直，通过范德华力与上下碱基相互作用。染料分子的固定位置及其与碱基的密切接近，导致染料与DNA结合时呈现荧光。DNA吸收254nm处的紫外辐射并传递给染料，而结合的染料本身吸收302nm和366nm的光辐射。这两种情况下，被吸收的能量在可见光谱红橙区的590nm处重新发射。EB-DNA复合物的荧光产率比没有结合DNA的染料高出20-30倍，因此，即使凝胶中存在游离的EB（0.5ug/ml），也可以检测到少至10ng的DNA条带。
EB可以用来检测单链或双链核酸（DNA或RNA）。尽管对单链核酸的亲和力相对较小，但其荧光产率也相对较低。事实上，大多数对单链DNA或RNA染色的荧光是通过染料结合到分子内部形成较短的链内螺旋产生的。
在存在EB的情况下，线状DNA的电泳迁移率约降低15%。因此，当需要知道DNA片段的准确大小（如DNA酶酶切图谱的鉴定）时，凝胶应该在无EB的情况下进行电泳，电泳结束后用EB染色。染色完毕后，通常不需要脱色。然而，在检测小量DNA（小于10ng）片段时，通常要将染色后的凝胶进行脱色。损害EB可以嵌入碱基分子中，导致错配。EB是强诱变剂，具有高致癌性！
通过SYBR Green I和EB的Ames测试可以发现，EB容易引起有机体突变。然而，EB的致癌性是通过细菌诱变实验（Ames测试）证明的结论。其结果的准确性存在许多疑问，这也就是为什么以前的《分子克隆》只说EB有可能具有致癌性，而不是一定就是致癌物质的原因。EB至今仍然是有效的兽药，用于治疗家畜的锥虫病。如果EB真有如此恐怖的致癌性或危险性，请问，家畜经EB治疗后还能活吗？经EB治疗的牛、羊肉还能在市面流通吗？
对于EB含量大于0.5mg/ml的溶液，可以按照以下步骤进行处理：将EB溶液用水稀释至浓度低于0.5mg/ml；加入一倍体积的0.5mol/L KMnO4，混匀，再加入等量的2.5mol/L HCl，混匀，置室温数小时；加入一倍体积的2.5mol/L NaOH，混匀并废弃。对于EB含量小于0.5mg/ml的溶液，可以按1mg/ml的量加入活性炭，不时轻摇混匀，室温放置1小时；用滤纸过滤并将活性碳与滤纸密封后丢弃。
扩展资料
EB是很多词的英文缩写，如电子商务(Electronic Business)、溴化乙锭（Ethidium bromide）、《不列颠百科全书》(《Encyclopedia Britannica》)、企业员工福利计划(Employee Benefit)等。
