发布网友 发布时间:2022-04-22 08:24
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热心网友 时间:2022-06-18 13:49
简单的说上游引物就是和要扩增基因片断上游序列结合的引物,下游引物指与目的基因片断下游序列结合者.
上游引物:DNA分子两端不一样,因为核苷酸分子不是对称的,5'位有个磷酸,3'位是-OH 就是:磷酸端和羟基端。DNA复制总是从5’端到3’端,因为DNA聚合酶只能往3’端加核苷酸。
下游引物:是沿着正链进行延长的。体外扩增DNA,双螺旋是部分或完全打开的,不存在冈崎片段,也不会一段段延长,理论上正反引物都是不间断延长的,和体内DNA自我复制是有区别的。
判断是上游引物还是下游引物的方法:是谁先复制谁是上游,往后的就是下游,上游下游是个相对概念,是某一个序列/碱基相对于另一个序列/碱基而言的。
扩展资料
引物(Primer)在聚合作用的起始时,可以刺激合成另一种大分子,并与反应物以共价键形式连接的序列。在核酸化学中,引物是一段短的单链RNA或DN*段,可结合在核酸链上与之互补的区域,其功能是作为核苷酸聚合作用的起始点,核酸聚合酶可由其3′端开始合成新的核酸链。体外人工设计的引物被广泛用于聚合酶链反应、测序和探针合成等。
上游引物:Forward primer,F-引物,又称为正向引物;下游引物:Reverse primer,R-引物,又称为反向引物。
参考资料: 百度百科-反向引物
参考资料: 百度百科-上游引物
热心网友 时间:2022-06-18 13:49
引物(Primer)在聚合作用的起始时,可以刺激合成另一种大分子,并与反应物以共价键形式连接的序列。在核酸化学中,引物是一段短的单链RNA或DN*段,可结合在核酸链上与之互补的区域,其功能是作为核苷酸聚合作用的起始点,核酸聚合酶可由其3′端开始合成新的核酸链。体外人工设计的引物被广泛用于聚合酶链反应、测序和探针合成等。
上游引物:DNA分子两端不一样,因为核苷酸分子不是对称的,5'位有个磷酸,3'位是-OH 就是:磷酸端和羟基端。DNA复制总是从5’端到3’端,因为DNA聚合酶只能往3’端加核苷酸。所以谁先复制谁上游,往后的就是下游,上游下游是个相对概念,是某一个序列/碱基相对于另一个序列/碱基而言。
DNA是双链,两个链是反向平行的,DNA聚合酶顺着其中一个链走,这个链就是负链,另一个链是反着一段一段复制的,这个是正链。
所以上游引物就是位于整个扩增子(就是被扩增的目的序列)的5’端的引物。同DNA负链互补,同正链序列相同。下游引物反之。