专利名称:一种NF-κB抑制物及其制备方法、以及作为抗肿
瘤药物的应用
专利类型:发明专利
发明人:黄爱龙,刘冰熔,向明确,唐霓申请号:CN02134191.5申请日:20021129公开号:CN1504483A公开日:20040616
摘要:一种NF-κB抑制物及其制备方法、以及作为抗肿瘤药物的应用。本发明设计两对诱变引物和一对RT-PCR引物,运用分子生物学相关技术,采用体外定点突变法分两次将第32和36位编码丝氨酸的密码子分别进行定向诱变,构建了IκBαM超级抑制物,将超级抑制物IκBαM从pGEM-T载体亚克隆到pAdTrack-CMV穿梭载体中,然后与AdEasy-1 System系统的腺病毒骨架质粒在大肠杆菌BJ5183中进行同源重组,线性化后转入293细胞进行包装、扩增以得到完整的重组腺病毒。然后在原核及真核细胞(包括293、HepG、HeLa、HUVEC、MAD-435S等细胞)中表达,得到的蛋白(表达的NF-κB的超级抑制物IκBαM)经Western blot、免疫组化等方法检测,结果表明此抑制物能稳定、高效、持续表达;同时,在进一步的体外实验研究中,联合TNF-α作用,初步显示了其抑制NF-κB的异常活化并抑制肿瘤细胞生长的效果。
申请人:重庆医科大学
地址:400010 重庆市渝中区医学院路1号
国籍:CN
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